葡萄拟尾孢菌PCR检测方法的建立

葡萄褐斑病又称叶斑病,是葡萄生产上的一种常见病害,根据病斑大小和病原物不同分为大褐斑病和小褐斑病.我国各地报道的葡萄褐斑病主要以大褐斑病为主,其病原为葡萄拟尾孢菌Pseudocercospora vitis(梁春浩等,2009),主要为害葡萄叶片,可造成叶片早期脱落,光合作用下降.目前该病的鉴别主要通过技术人员实地观察,主观性强,传统的病原分离培养和鉴定虽然结果准确,但需较长时间.分子检测方法具有灵敏度高、特异性强、速度快等特点(王娜等,2004),但在该病的鉴定上尚未见相关应用报道.尽管目前葡萄拟尾孢菌尚未完成全基因组测序,但该菌的RNA聚合酶基因序列已公布(GenBank登录号KX348076).因此,本研究拟建立一种锚定葡萄拟尾孢菌RNA聚合酶基因的PCR检测方法,以期为葡萄褐斑病的快速准确鉴定提供技术支撑.