外周神经损伤后脊髓HDAC2表达的增加对mu阿片受体表达的影响

目的:研究神经病理性疼痛时损伤侧脊髓背角去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)表达的增加对吗啡镇痛以及mu阿片受体(opioid receptor,MOR)表达的影响.方法:清洁级C57BL/6J小鼠,应用坐骨神经慢性压迫性疼痛模型(chronic constrictive injury,CCI),采用随机数字表法分为:(1)假手术组、手术组;(2)手术+溶剂组、手术+苯胺异羟肟酸(SAHA)组;(3)手术+NC-siRNA组、手术+HDAC2 siRNA组;(4)AAV5-EGFP组,AAV5-HDAC2组.通过腹腔注射吗啡后30 min测量小鼠损伤侧热缩足反射潜伏期,计算吗啡的最大可能镇痛效应(max possible analgesia effect,MPAE)来评估吗啡的镇痛效应的改变.术后第7天通过Western blot和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各蛋白的表达水平变化.结果:(1)和假手术组相比,术后第7天,手术组吗啡的镇痛作用降低,损伤侧脊髓背角MOR蛋白的表达降低,HDAC2蛋白的表达增加,乙酰化的组蛋白H3(AcH3)表达水平降低;(2)术前30 min鞘内注射去乙酰化酶抑制剂SAHA连续7天,和溶剂组相比SAHA提高脊髓背角MOR蛋白的表达水平,降低HDAC2蛋白的表达水平,增加组蛋白H3的乙酰化水平,吗啡的镇痛效能增加;(3)术前30 min鞘内注射HDAC2 siRNA连续3天,和对照组相比,HDAC2-siRNA组在术后第7天脊髓背角HDAC2蛋白的表达降低,MOR的蛋白表达增加,组蛋白H3的乙酰化水平增加,吗啡的镇痛效能增加;(4)正常小鼠鞘内注射AAV5-HDAC2过表达脊髓背角的HDAC2后28天,和对照组相比,脊髓背角的HDAC2的蛋白表达水平明显增加,组蛋白H3的乙酰化水平明显降低,MOR的蛋白表达水平明显降低,吗啡的镇痛效能降低.结论:外周神经损伤后脊髓HDAC2表达的增高可以导致损伤侧脊髓背角MOR表达的降低,降低吗啡的镇痛效应.