RNA干扰CRMP 5抑制大鼠海马神经元突起生长

目的：探讨CRMP5对大鼠海马神经元突起生长的影响。方法将带FAM标记的CRMP5的特异性干扰片段及阴性对照转染培养成熟的海马神经元，用免疫荧光的方法验证干扰片段对神经元内源性CRMP5的干扰效果，并利用共聚焦显微镜观察神经元突起以及侧枝的形成。结果携带FAM的siRNA可以成功的进入细胞，分布于神经元的胞体以及树突；免疫荧光证实CRMP5 siRNA可以有效的沉默CRMP5蛋白的表达；沉默CRMP5基因表达后的海马神经元突起短小，而且缺少分支，而对照细胞突起长，分支多；定量分析显示，导入CRMP5 siRNA的细胞突起的长度较对照细胞缩短，差异显著(P<0.05)；突起的数目比较，一级突起数目无显著差异，而二级及其以上突起的数目明显减少，差异显著(P<0.05)。结论沉默CRMP5可抑制海马神经元突起的生长和侧枝形成。