乳腺癌微转移骨髓播散肿瘤细胞检测方法
Zhongguo linchuang yanjiu(2022)
摘要
目的 探讨乳腺癌患者骨髓中播散肿瘤细胞(DTC)敏感的免疫细胞化学检测方法.方法 首先用人源性乳腺癌细胞株MCF-7作为标本,建立成熟的免疫细胞化学染色方法(DAB法、APAAP法);再用人源性乳腺癌细胞株SK-BR3、MDA-MB 231、SUM1315作为标本,向健康人外周血提取的单核细胞中加入细胞株进行检测,从而验证免疫细胞化学染色方法的敏感性;最后收集可手术乳腺癌患者的骨髓标本进行临床检测.选择细胞角蛋白(CK)作为肿瘤细胞标志物.并对乳腺癌骨髓微转移与TNM分期进行相关性分析.结果 建立能检测到MCF-7等乳腺癌肿瘤细胞的免疫细胞化学方法DAB法、APAAP法.DAB法、APAAP法检测肿瘤细胞的敏感度为在1×105个单核细胞中可以找到1个肿瘤细胞;DAB法检测34例乳腺癌患者骨髓标本,6例患者骨髓中存在DTC细胞,5例可疑存在DTC细胞,其余23例未见到DTC细胞.骨髓微转移阳性组患者的T2、T3及N1、N2、N3分期占比较骨髓微转移阴性组患者明显增高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 本研究建立较为可靠的免疫细胞化学检测方法,初步表明可用于检测乳腺癌患者骨髓内有无肿瘤细胞播散,有助于判断患者的预后和指导个体化治疗.
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关键词
breast cancer,immunocytochemistry,disseminated tumor cells,bone marrow,micrometastasis,diaminobenzidine,alkaline phosphatase-anti-alkaline phosphatase,cytokeration
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