香叶木素通过调节小鼠的肠道免疫平衡减轻克罗恩病样结肠炎:基于抑制PI3K/AKT通路

目的 明确香叶木素对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠克罗恩病(CD)样结肠炎的作用效果和机制.方法 将野生型小鼠(WT)随机分为3组:WT组、TNBS诱导的CD样结肠炎组(TNBS组)和香叶木素干预的结肠炎组(50 mg·kg-1·d-1;Dios组),8只/组;采用肠炎疾病活动(DAI)评分、体质量改变、肠炎组织学评分、结肠长度和ELISA法检测的肠黏膜炎症介质水平(TNF-α、IFN-γ、IL-17A)等评估肠炎程度;流式细胞术分析肠系膜淋巴结中T淋巴细胞亚群(Th1/Th2、Th17/Treg)变化;通过网络药理学和分子对接技术分析香叶木素调控PI3K/AKT通路的作用,并在体验证香叶木素改善TNBS小鼠CD样肠炎与抑制PI3K/AKT信号的关系.结果 动物实验显示,Dios组小鼠DAI评分、肠炎组织学评分、体质量降低幅度及结肠黏膜炎症介质水平(TNF-α、IFN-γ、IL-17A)均低于TNBS组小鼠(P<0.05),但仍然高于WT组(P<0.05);Dios组小鼠结肠长度大于TNBS组(P<0.05),小于WT组(P<0.05);Dios组小鼠肠系膜淋巴结中Th1/Th17细胞比例低于TNBS组(P<0.05),高于WT组(P<0.05);Th2/Treg细胞比例高于TNBS组(P<0.05)和WT组(P<0.05).网络药理学分析获得香叶木素和CD交集靶点46个,其中AKT1、EGFR、SRC、ESR1、MMP9、PTGS2为排名前6位的关键靶点;GO和KEGG分析显示,香叶木素改善CD样结肠炎作用与磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)等信号通路密切相关;分子对接显示香叶木素与关键靶点结合较好.Western blot检测结果显示,Dios组小鼠结肠黏膜p-PI3K和p-AKT水平低于TNBS组(P<0.05),高于WT组(P<0.05).结论 香叶木素可能通过抑制PI3K/AKT信号调控Th1/Th2和Th17/Treg平衡,改善肠黏膜免疫紊乱,从而缓解TNBS小鼠CD样肠炎.